細(xì)胞名稱：HEP-53.4 小鼠肝癌細(xì)胞

細(xì)胞別名 ：HEP-53.4 ; 53.4 ; 小鼠肝癌細(xì)胞

細(xì)胞來源 ：德國

細(xì)胞鑒定： STR鑒定已通過

細(xì)胞形態(tài) ：上皮樣細(xì)胞，貼壁生長

培 養(yǎng) 基 ：DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%

培養(yǎng)條件 ：氣相空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

凍存條件： 無血清凍存液，液氮儲存

細(xì)胞背景：來源于 C57BL/6J小鼠的原發(fā)性肝細(xì)胞癌，這些小鼠肝細(xì)胞忠實地代表了肝細(xì)胞癌，并為研究這種類型的肝癌提供了有價值的模型，同義詞HEP-53.4和53.4，它們便于識別和交叉引用，肝細(xì)胞癌是一個重大的健康問題，這些細(xì)胞能夠?qū)ζ浞肿油?、?xì)胞相互作用和治療策略進(jìn)行精確研究，這些細(xì)胞起源于Mus musculus(小鼠)，為理解和開發(fā)肝細(xì)胞癌的治療方法提供了相關(guān)的模型系統(tǒng)。

細(xì)胞用途 ：僅供科研使用

細(xì)胞貨期：現(xiàn)貨，1周左右

細(xì)胞事項

常溫發(fā)貨

收到后T25瓶消毒再放置培養(yǎng)箱靜置2-3小時后觀察密度和狀態(tài)拍照2-3張反饋給銷售，密度達(dá)標(biāo)就可以傳代。前期傳代比例1:2，等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成1個1ml凍存管，另外一瓶繼續(xù)傳代，反復(fù)凍存2-3只后才擴(kuò)增做實驗，以防突發(fā)情況引起斷種。

干冰發(fā)貨

常規(guī)細(xì)胞發(fā)貨凍存管2只，復(fù)蘇1只，另外一只備用，第一個復(fù)蘇不成功時嚴(yán)格按照廠家要求復(fù)蘇第二個，均沒有復(fù)蘇成功的情況即時留存復(fù)蘇照片通知我們。

注意事項

1. 常規(guī)消化收集細(xì)胞離心。

2. 離心后去掉離心管內(nèi)上清，加入1ml重懸細(xì)胞混勻，建議輕輕晃動或者輕輕吹打細(xì)胞， 放入培養(yǎng)箱消化細(xì)胞，再消化1min左右。

3. 消化好后，用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞團(tuán)分散，迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化，。

5. 顯微鏡下觀察看細(xì)胞是否成均勻分散的單細(xì)胞，若有少量成團(tuán)的小細(xì)胞團(tuán)可不用重新消化，使之貼壁后待細(xì)胞生長穩(wěn)定后再消散細(xì)胞。

4. 加入5ml左右的細(xì)胞相應(yīng)的培養(yǎng)基混勻，按比例接入培養(yǎng)瓶/皿中。

貼壁細(xì)胞

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％(w / v） EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

特別注意

該細(xì)胞在 DMEM(含 1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長良好，大部分的 DMEM 含有較 高濃度的 NaHCO3（3.7g/L），若使用 DMEM（3.7g/L NaHCO3）培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì) 胞時需要提高 CO2 濃度（7%-10%）